作者:王建,刘雯,张炜,姚蓉,李伟,覃洁萍
【摘要】 目的建立以高效液相色谱法测定桂莪术中吉马酮含量的方法,并检测广西不同产地桂莪术中吉马酮的含量。方法采用Shim-pack CLC-ODS柱(6.0 mmID×15 cm, 5 μm),流动相为乙腈-水(60∶40),流速:l ml/min,检测波长215 nm。结果吉马酮在5.825~582.5 μg/ml范围内样品浓度与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 92),平均回收率为101.41%,RSD=2.82%(n=6)。结论福绵、港江、兴业3个产地吉马酮含量最高;不同产地桂莪术中吉马酮的含量存在较大差异。
【关键词】 莪术 吉马酮 高效液相色谱法
中药莪术是姜科植物蓬莪术Curcuma phaeocaulis Valeton,广西莪术Curcuma kw angsiensis S. G. Lee C. F. Liang和温郁金Curcuma wenyujin Y. H. Chen et C. Ling的根状茎,具抗肿瘤、抗菌、行气破血、消积止痛等功效,主治积滞胀痛、血腹痛、肝脾肿大、血滞经闭、早期宫颈癌〔1〕。首载于《雷公炮炙论》。主要产于四川、福建、浙江、广西等地。其中广西莪术Curcuma kw angsiensis S. G. Lee C. F. Liang又名桂莪术,主要分布于广西桂中南地区。莪术中含挥发油、姜黄素等成分,挥发油为其抗肿瘤有效成分,姜黄素为其降血脂、抗氧化、抗炎的主要有效成分。研究中发现,莪术油中的吉马酮含量较高,且对癌细胞具有一定的抑制作用〔2〕。为了能更好地控制广西莪术的质量,现用HPLC法对广西境内不同产地的广西莪术进行含量测定,研究比较其含量差异。
1 仪器与试药
美国Agilent1100Series型高效液相色谱仪:四元泵,在线脱气机,自动进样器(G1313A),柱温箱,可变波长检测器。Simplicity185型超纯水系统(MILLIPORE)。KQ-200VDB型双频数控超声波清洗器(昆山超声仪器有限公司)。LG-16W型离心机(北京医用离心机厂)。甲醇、乙腈为色谱纯,其余试剂均为分析纯,水为高纯水。吉马酮对照品(中国药品生物制品检定所,供含量测定用,批号111665-200401)。药材采自各个产地,经本校药用植物教研室王建老师鉴定为姜科植物广西莪术Curcuma kw angsiensis S. G. Lee C. F. Liang。
2 方法与结果
2.1 色谱条件日本岛津公司Shim-pack CLC-ODS柱(6.0 mmID×15 cm,5 μm);流动相为乙腈-水(60∶40),流速:1 ml/min,柱温:35℃,检测波长215 nm。进样量5 μl。理论塔板数以吉马酮峰计应不低于6 000。在此色谱条件下,吉马酮对照品和桂莪术样品的HPLC色谱图分别见图1~2。
2.2 对照品溶液的配制精密称取吉马酮对照品11.65 mg,置10 ml量瓶中,加60%乙腈溶解并定容至刻度,即得吉马酮对照品储备液。 分别精密量取5 ,25,50,250,500 μl对照品储备液,置1 ml量瓶中,用60%乙腈定容至刻度,即得不同浓度的吉马酮对照品溶液。
2.3 供试样品溶液的制备取切碎的广西莪术鲜根茎5 g,精密称定,精密加入甲醇25 ml,称定重量,回流提取1 h,放冷至室温,用甲醇补足减失的重量,摇匀,0.45 μm滤膜滤过,即得。