作者：兰雁，陈文文，罗诚，黄勤挽，吴纯洁
【关键词】 三参胶囊；,,质量标准；,,薄层色谱；,,高效液相色谱
摘要：目的建立三参胶囊的质量标准。方法采用薄层色谱法对丹参、人参、制首乌进行了定性鉴别，采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）法测定了胶囊中丹参素钠的含量，采用Shimpack VP－ODS C18柱（5 μm，150 mm×4.6 mm）；检测波长280 nm；流动相：0.5%冰醋酸-甲醇（94∶6）；流速：1.0 ml?min-1；柱温：30℃。结果此法线性范围0.110 9～1.663 5μg，r=0.999 9；丹参素钠的平均回收率为98.82%（RSD=1.45%，n=5）。结论该方法稳定、可靠，可作为该制剂的质量控制方法。
关键词：三参胶囊； 质量标准； 薄层色谱； 高效液相色谱
Abstract：Objective To develop a quality standard for Sanshen capsule. MethodsTLC was used to identify the ingredients such as Danshen Root Ginseng Root and Tuber Fleeceflower Root respectively . Meanwhile, the content of Danshensu in Sanshen capsule was determined by RPHPLC with Shim-pack VP－ODS C18（5 μm，150 mm×4.6mm） .The detection wavelength was 280 nm；0.5%Acetic acid-Methanol（94∶6）was used as mobile phase, the rate of 1.0 ml?min-1and the column temperature was at 30℃.ResultsThe method was linear within the range of 0.110 9～1.663 5 μg,（r=0.999 9）. The average recovery of Danshensu was 98.82%,（RSD＝1.45%，n=5）.ConclusionThe method is accurate，reliable,and can be used for quality control of the production.
Key words：Sanshen capsule; Quality standard; TLC； HPLC
三参胶囊由丹参、三七、人参、制首乌等8味药组成，此方属于医院临床经验方，为更好发挥本方疗效，满足临床不断扩大的需求，现按中药新药6类注册要求研制开发，制成胶囊剂。本方功能主治为破瘀消，扶正祛邪。临床用于治疗气滞血瘀型及气虚血瘀型肺癌为主的恶性肿瘤。本文对方中丹参、制首乌、人参、三七进行了薄层色谱鉴别研究；采用RPHPLC法测定方中主药丹参中丹参素钠的含量，研究的方法简便、快速、重复性好，可作为本品质量控制方法。现报道如下：
1 仪器与试药
岛津LC10ATvp液相色谱仪，SPDM10Avp检测器，浙江大学2010色谱工作站；sartoriusBP211D电子天平（感量0.1 mg；0.01 mg，载量210 g；80 g）；autoscienceAS5150A超声波清洗器；TGL-16G高速离心机；939全自动薄层制板器，ZF90型暗箱紫外透射仪（上海顾村电光仪器厂）。丹参素钠（110855200304，供含量测定用），中国药品生物制品检定所提供。丹参酮ⅡA（0766200213），中国药品生物制品检定所提供。人参二醇（0701200109，供鉴别用），中国药品生物制品检定所提供。人参三醇（0702200009，供鉴别用），中国药品生物制品检定所提供。何首乌对照药材（09349704），中国药品生物制品检定所提供。三参胶囊，批号20030401，20030402，20030403；硅胶G由青岛海洋化工厂生产，水为重蒸馏水；甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。所有药材均购于市场，经检验均符合《中国药典》2000年版Ⅰ部各药材项下的规定。
2 方法与结果
2.1 定性鉴别
2.1.1 丹参的薄层色谱鉴别〔11〕取本品2.5 g，加乙醚10 ml，超声处理10 min，滤过，残留物备用，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯适量使溶解，作为供试品溶液。另取丹参酮ⅡA对照品，加醋酸乙酯制成每毫升含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2000版Ⅰ部附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各5 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯（19∶1）为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，见图1a。
2.1.2 制首乌的薄层色谱鉴别〔2~3〕 取本品2.5 g，加甲醇50 ml，超声处理15 min，滤过，滤液水浴挥干，残渣加水10 ml使溶解，再加盐酸2 ml，置水浴上加热回流30 min，立即冷却，用乙醚提取两次，20 ml/次，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇2 ml使溶解，作为供试品溶液。另取何首乌对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2000版Ⅰ部附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各5 μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸（15∶2∶1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，见图1b。再置氨蒸气中熏数分钟后，日光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，见图1c。
2.1.3 人参、三七的薄层色谱鉴别 取本品5 g，加7％硫酸溶液100 ml，置水浴上加热回流1 h，放冷，用石油醚（30～60℃）振摇提取3次，50 ml/次，合并石油醚液，挥干，残渣加0.5 ml无水乙醇使溶解，作为供试品溶液。另取人参二醇、人参三醇对照品，加无水乙醇制成每毫升各含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2000版Ⅰ部附录VIB）试验，吸取上述供试品溶液10 μl，对照品溶液5 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿乙醚（1∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，见图1d。
图1 丹参、制首乌、人参、三七的薄层色谱鉴别（略）
2.2 含量测定〔4〕
2.2.1 色谱条件 Shimpack VPODS C18柱（5 μm，150 mm×4.6 mm）；流动相：0.5％冰醋酸甲醇（94∶6）；流速：1.0 ml?min-1；检测波长280 nm；柱温：30℃；进样量：10 μl。