作者：秦春梅， 黄晓丹， 冯冲， 冼建民
【关键词】 高效液相色谱法；,,克感利咽口服液；,,栀子苷
摘要：目的建立高效液相色谱 (HPLC)法测定克感利咽口服液中栀子苷的含量。方法采用高效液相色谱法，以 Diamonsil(钻石)C18柱为固定相，甲醇-水(29：71)为流动相，流速1 ml/min，检测波长241 nm，柱温30°C。结果在0.236 4～1.773 μg范围内，栀子苷的量与峰面积积分值呈良好的线性关系，r＝0.999 9，平均回收率98.96％，RSD ＝2.31％。结论所建立的方法能准确、快速地进行定量检测，可用于克感利咽口服液的质量控制。
关键词：高效液相色谱法； 克感利咽口服液； 栀子苷
Determination of Geniposide in Kegan Liyan Oral Solution by HPLC
Abstract:ObjectiveTo establish a method for determination of geniposide in Kegan Liyan Oral Solution．MethodsHPLC method was selected to determine the content of geniposide．The chromatographic conditions included Diamonsil C18 column，methanol-water(29:71) as the mobile phase, the detection wavelength at 241nm，flow rate 1.0ml/min and column temperature at 30°C. ResultsThe linear range was 0.236 4～1.773 μg and the average recovery was 98.96%,RSD ＝2.31％．ConclusionThis method is accurate and quick ,and can be used for the quality control of Kegan Liyan Oral Solution.
Key words:HPLC； Kegan Liyan Oral Solutio； Geniposide
克感利咽口服液是王老吉药业股份有限公司和中国中医研究院广安门医院合作研制的原三类中药新药，临床上主要用于治疗风热外侵，邪热内扰之症引起的呼吸道感染，疗效确切，是我公司的主流产品之一，2004年被批准为中药保护品种。原质量标准采用薄层色谱法测定栀子苷含量，样品采用多次萃取制备供试品溶液，该方法较繁锁，测定方法也较为复杂。根据国家中药保护品种委员会意见和我单位实际情况，确定修改质量标准栀子苷的含量测定方法，采用高效液相色谱法测定栀子苷含量，测定结果表明，该测定方法简便可行，重现性好。栀子苷 (geniposide)是栀子化学成分中一种重要的环烯醚萜类化合物，《中国药典》2005年版Ⅰ部以栀子苷作为栀子的薄层色谱鉴别、高效液相色谱含量测定的对照品〔1〕。根据文献报道，栀子的含量测定方法有薄层色谱紫外分光光度法〔2〕，薄层色谱扫描法〔3~5〕，高效液相色谱法〔6~7〕 等。本实验采用高效液相色谱法测定栀子苷含量，分析速度快，灵敏度高，专属性强，应用范围广，重现性与准确性均优于薄层色谱紫外分光光度法、薄层色谱扫描法。
1 仪器与试药
1.1 仪器 Waters 600高效液相色谱仪（600低压梯度泵、717自动进样器、2996 DAD检测器,柱温箱，）；Empower工作站；Bp211-D型电子天平（十万分之一，德国 Sartorous 公司）。
1.2 药品与试剂 栀子苷对照品（中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号110749-200309）；甲醇为色谱纯，水为高纯水，其余试剂均为分析纯；克感利咽口服液由广州王老吉药业股份有限公司生产提供；缺栀子阴性制剂自制。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备 精密称取栀子苷对照品5.91 mg，置50 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，制成每毫升中含栀子苷0.118 2 mg的溶液，即得。
2.2 供试品溶液的制备 精密移取克感利咽口服液（批号030402）2 ml，置25 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。用0.45 μm滤膜过滤，取续滤液，即得。
2.3 阴性对照溶液的制备 除去栀子，按照克感利咽口服液的制备方法制备阴性样品，按供试品溶液的制备方法制备成栀子阴性对照溶液。最大吸收波长的确定 经紫外光谱检测，栀子苷在241 nm处有紫外最大吸收，故选择该波长为检测波长。与《中国药典》2005年版Ⅰ部栀子项下的规定一致，光谱图如图1。
a栀子苷 b克感利咽样品 c栀子药材 d栀子阴性光谱图